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非洲豬瘟檢測設備及儀器使用說明

非洲豬瘟從2018年年底至今一直是大家關注的熱點，許多大型的屠宰產，和當地的政府機構，都將及時發現非洲豬瘟，及時檢測出非洲豬瘟，及時將非洲豬瘟疫情控制住，減少人民和企業的損失作為重點工作，本公司提供非洲豬瘟檢測的相關設備并且提供配套的試劑盒和相關的檢測說明，下面就設備清單和試劑盒檢測說明為大家呈現，歡迎隨時跟公司業務經理洽談業務。

 非洲豬瘟檢測設備及儀器使用說明操作步驟

樣品處理

血液樣品直接用；淋巴結、脾臟、扁桃體樣品，用無菌的剪刀和鑷子剪取待檢樣品2.0 g于研缽中充分研磨，再加10.0 mL PBS（pH 7.2，含1萬單位*和1萬單位*）混勻（樣品不足2.0 g按1:5比例加PBS），對處理的待檢樣品置70℃，30 min滅活后，3 000 r/min，4 ℃離心5 min，取上清液，編號備用；血球粉處理同上，只不過省掉研磨步驟。

1.2 樣品存放

采集或處理好的樣品在2℃～8℃條件下保存應不超過24 h；若需長期保存，須放置-80 ℃冰箱，但應避免反復凍融（凍融不超過3次）。

1.3 操作步驟

1.3.1 病毒DNA的提取（使用A盒）

（1）待檢樣品、陽性對照和陰性對照的份數總和用n表示，取n個滅菌的1.5 mL離心管，逐管編號。

（2）每管加入Buffer A 500 mL。

（3）每管分別加入已處理的待檢樣品、陽性對照、陰性對照各200 mL，充分混勻，室溫放置10分鐘。

（4）取與上述離心管等量的DNase-Free吸附柱和收集管，編號。將離心管中的溶液轉移至DNase-Free吸附柱，（為避免堵塞吸附柱，盡量不要吸懸浮雜質）。

（5）13000 r/min室溫離心30 sec。

（6）棄去收集管液體，將吸附柱放回收集管中。

（7）吸附柱內加入600 μL Buffer B，13000 r/min離心30 sec。

（8）棄去收集管液體，將吸附柱放回收集管中。

（9）重復步驟（7），（8）。

（10）13000 r/min空柱離心2 min，去除殘留液。

將每個吸附柱分別移入新的1.5mL離心管中，向柱*加入50 μL Buffer C，室溫靜置1 min，13000 r/min離心30 sec，離心管中液體即為模板DNA。獲得的DNA溶液，冰上保存備用（注意提取的DNA須在2 h內進行PCR 擴增，若需長期保存須放置-80 ℃冰箱，但應避免反復凍融）。