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《飼料中慶大霉素的測定 液相色譜-串聯質譜法》征求意見

2023-12-25 09:40:56 來源：儀表網 閱讀量：10314

　　近日，由中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所 、四川威爾檢測技術股份有限公司 、通威股份有限公司等單位起草，TC76(全國飼料工業標準化技術委員會)歸口的國家標準計劃《飼料中慶大霉素的測定 液相色譜-串聯質譜法》征求意見稿已編制完成，現公開征求意見。
 
　　慶大霉素是廣譜抗生素，對葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、炭疸桿菌等革蘭氏陽性菌和大腸桿菌、沙門氏菌、綠膿桿菌、巴氏桿菌等革蘭氏陰性菌均有良好抑殺作用，對結核桿菌的殺菌力也較強，是目前我國畜牧業和水產業中常用的獸藥之一，主要用于敏感菌引起的消化道、呼吸道、泌尿生殖系統感染及敗血癥等。對豬牛羊的治療，如肺炎、鼻炎等，可抑制引起呼吸道感染的細菌的生長，減輕炎癥癥狀，并幫助恢復呼吸系統的正常功能，修復腸道功能，減輕腹瀉癥狀，并促進消化道健康。
 
　　由于慶大霉素的毒性，飼料中添加的慶大霉素被動物機體吸收，產生動物蓄積，使人食用含有慶大霉素的動物性食品后在人體內產生耐藥性和一定的毒性。因此，飼料中慶大霉素的殘留和抗生素污染已成為國內外的關注熱點之一。農業部出臺了一系列公告禁止抗生素在飼料中的使用，并于2019年發布194號公告，規定自2020年起，飼料生產企業停止生產含有促生長類藥物飼料添加劑的商品飼料，隨著抗生素在飼料中的禁用，慶大霉素也正式在飼料中禁用。然而慶大霉素在飼料中非法添加和外源污染問題時有發生，對飼料工業發展、人類健康和環境安全帶來大量的負面影響。因此，制訂飼料中慶大霉素的檢測標準具有重要意義。
 
　　本文件按照GB/T 1.1-2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件起草單位：中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所、四川威爾檢測技術股份有限公司、通威農業發展有限公司。
 
　　本文件描述了飼料中慶大霉素的液相色譜-串聯質譜測定方法。本文件適用于配合飼料、濃縮飼料、精料補充料和添加劑預混合飼料中慶大霉素的測定。本文件慶大霉素的檢出限為50μg/kg，定量限為100μg/kg。
 
　　原理：
 
　　試樣中的慶大霉素用5%三氯乙酸溶液提取、混合型陽離子交換固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯質譜儀測定，基質匹配曲線校準，外標法定量。
 
　　儀器設備：
 
　　1.液相色譜-串聯質譜儀：配電噴霧離子源(ESI)。
 
　　2.分析天平：精度為0.1mg 和0.01mg。
 
　　3.離心機：轉速不低于8000r/min。
 
　　4.超聲波清洗儀。
 
　　5.固相萃取裝置。
 
　　6.氮吹儀。
 
　　樣品：
 
　　按照GB/T 20195規定制備試樣，至少200g，粉碎使其全部過0.425mm試驗篩，混合均勻，裝入密閉容器中，備用。選取類型相同，均勻一致、且在待測物保留時間處，儀器響應值小于方法定量限30%的飼料樣品，作為空白樣品。
 
　　液相色譜參考條件如下：
 
　　a)色譜柱：C18色譜柱，柱長100mm，內徑2.1mm，粒徑1.7μm，或性能相當者；
 
　　b)柱溫：30 ℃；
 
　　c)流速：0.4mL/min；
 
　　d)進樣量：5L；
 
　　e)流動相：A 相為0.1%甲酸溶液(5.7)，B 相為 0.1%甲酸乙腈溶液(5.8)。
 
　　質譜參考條件如下：
 
　　a) 電離方式：電噴霧電離，正離子模式(ESI+)；
 
　　b) 檢測方式：多反應監測(MRM)；
 
　　c) 霧化氣、干燥氣為高純氮氣，碰撞氣為高純氬氣或其他合適氣體；
 
　　d) 噴霧電壓、碰撞能量等參數應優化至最優靈敏度。
 
　　定量：
 
　　以基質匹配標準系列溶液中待測組分的質量濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，標準曲線的相關系數應不低于0.99。試樣溶液與標準溶液中待測物的響應值均應在儀器檢測的線性范圍內，如超出線性范圍，應重新測定。單點校準定量時，試樣溶液中待測組分質量濃度與標準溶液質量濃度相差不超過30%。
 
　　精密度：
 
　　在重復性條件下，兩次獨立測定結果與其算術平均值的絕對差值不大于該算術平均值的20%。
 
　　更多詳情請見附件。

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